笔者在2015年时便发现了利用渔用配合饲料培养光合细菌的方法,但是培养时间偏长,于是又继续改进了方法。现将改进后方法进行介绍。

微生物制剂是将自然界有益细菌通过人工筛选培育,再经过生物工程工厂化生产出来,用于生态调控及动物营养保健的活菌制剂。现在市场上销售的这类产品名目繁多,如EM菌、光合细菌、芽孢杆菌、硝化细菌、乳酸菌、酵母菌等,都属微生物制剂的同类产品。就有益菌种来讲,美国发布了40种安全有效的有益菌种,我国农业部允许使用的有益菌种有干酪乳杆菌、嗜乳酸杆菌、乳链球菌、枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、啤酒酵母菌、沼泽红假单胞菌等12种。依活菌种的组成,有单一菌制剂和复合菌制剂。市售的多为复合菌制剂,只是其中的菌种种类和数量有别而异。

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芽孢杆菌:芽孢杆菌可以促进有益微生物形成优势,转化养殖代谢产物,促进养殖水体物质循环。在放苗前“养水”时,施用芽孢杆菌,不断提供营养元素培养优良浮游微藻,优化水环境和培养活饵料,还能形成有益生物絮团,作为优质饵料。养殖中施用可抑制有害菌繁殖,优化养殖环境,降低饲料系数。市售多是粉状产品,使用前可用配制好的培养基活化、增殖,几小时后用池水稀释,全池泼洒。

该方法的主要不便或者说不足之处是培养容器中水较深时(>1米)需要曝气,其能促进饲料的降解,而养殖场中一般都具备曝气设施,也可以使用常规的曝气石进行空气曝气,以促进饲料降解和光合细菌优势的形成。

另一类是用以改良水质的微生态调控剂,主要菌类有光合细菌、芽孢杆菌、硝化细菌等。各类菌有其自身特性,使用时要针对不同目的采用不同方法,才能最大限度地发挥其功效。

另外,许多养殖户对有益微生物制剂一知半解,或受广告夸大宣传的影响,简单地认为使用有益微生物制剂是只要向池中泼洒既可,不管是什么菌种的制剂、有何使用要求等,使用上存在着盲目性问题。事实上,因有益微生物制剂是由活菌组成的,其作用的发挥与施用活菌的数量、时间、气候、水质条件等均有直接影响;且有益微生物制剂只有在水体中增殖到优势种群后才能发挥作用,这需要几天的时间才能反应出来,应在使用后加以观察和检测有关指标。

微生态制剂的应用,可促进有益菌形成优势,快速降解有机物,减少养殖代谢产物和有害物质,降低养殖水体的氨氮、亚硝酸盐、硫化氢等有害因子,改善水质。可降低水生生物发病率,提高生长速度,降低饲料系数。单产可增加15%以上,效益可提高20%。

本方法能够获得附着态生长的高密度红假单胞菌属光合细菌,其中附着态光合细菌的浓度远高于浮游态的光合细菌。下面展示一些光合细菌培养的效果图及所需的时间等。

二、微生物制剂作用与特点(一)对水体的作用微生物制剂可有效降低养殖水质中亚硝酸盐、氨氮、硫化氢等浓度,抑制水体中有害微生物繁殖和生长,净化水质。(二)对养殖动物的作用微生物制剂可使养殖动物提高机体免疫力。防止水产养殖动物体内有害物质产生。同时,转化养殖动物肠道、血液及粪便中有害物质浓度,降低有害物质在机体内的累积,有利于机体的健康。(三)降低成本,保护环境微生物制剂具有投资小、效益高、使用方便等优点。既能全池泼洒,也能做为饲料添加剂。无毒、无害、无药物残留,长期使用可以减少养殖过程中抗生素的使用量,减少病害发生,排放的污水对环境污染也较小。三、微生态制剂用于调控水质的使用原则自然水体存在一定的细菌生态平衡系统,施用微生态制剂是人为改变条件,定向培育优势菌群并发挥其作用,形成新的动态平衡。在微生态制剂的使用过程中,首先要根据水体的理化因子正确选用菌种;其次,施放微生态制剂要达到一定的浓度、确保水体中活菌数达到一定数量,并营造适合培育菌种的生长条件,使之尽早形成并维持优势菌群,以取得良好的使用效果。四、主要菌属的特性及使用方法1、光合细菌1.1光合细菌的特性在水产养殖中应用较多的有红螺菌科的荚膜红、沼泽红、球形菌、深红红螺菌等种类,大多数种类为厌氧性或兼性厌氧性。光合细菌细胞内含有类似于植物叶绿素的细菌叶绿素,在无氧和光照条件下,利用水体中有机物进行不产氧的光合作用。1.2
光合细菌净化水质的机理光合细菌细胞内含有类似于植物叶绿素的细菌叶绿素,在无氧和光照条件下,利用水体中鱼虾残饵及排泄物等有机物进行不产氧的光合作用,合成大量菌体。所以其增氧机制是通过同化水中有机物,减少有机耗氧来实现的。光合细菌还能以硝酸盐或亚硝酸盐作为生理代谢上的氧化剂,吸收利用水中的硝酸盐及亚硝酸盐。不少光合细菌还利用硫化物。以上机制形成了光合细菌很强的净化水质的功能。1.3光合细菌的使用和保存在水温28℃~36℃
,pH偏碱(7.5~8.5)时,光合细菌生长较好。对有机物浓度较高、底质较差、有一定透明度的浅水池使用效果明显。这是因为有机物高的底质易形成无氧条件,有一定透明度满足光合细菌大量生长、繁殖的要求。养殖户在使用光合细菌改善水质时,可选在晴天上午进行,光合细菌用沸石粉吸附后泼洒能提高使用效果。由于水中光合细菌的浓度会因换水及生物吞食而降低,不能稳定地发挥净化水质的功能,已有人尝试将光合细菌固定化并应用于试验和生产中,使净化水质的效果得到进一步的改善。由于光合细菌制品多为活菌液,为保证使用效果,应注意尽量使用新鲜菌液以保证活菌数。成品菌液应先逐渐降温而后存放在温度较低(15℃
以下)并有一定光照的地方(每天2
h以上),然后逐渐减少光照,再置于阴凉避光处。菌液开始发黑并有恶臭味可能是活菌死亡腐败所致,使用效果不佳。2、芽孢杆菌2.1
芽孢杆菌的特性芽孢杆菌,革兰氏染色阳性,是普遍存在的一类好气性细菌,多属芽孢杆菌属。该类菌无毒性,能分泌出活性强的蛋白酶等多种酶类,在其生命过程中又能以孢子体形式存在,易于生产和保存,作为饲料微生态添加剂和水体微生态调控剂都有广阔前景。2.2
芽孢杆菌的作用机理芽孢杆菌作为水体微生态调控剂的作用机理,是通过经筛选出有类似于硝化细菌功能的菌株,可以降低水体中硝酸盐、亚硝酸盐的含量,从而起到改善水质的作用。芽孢杆菌还可以通过消灭病原体或是至少减少了病原体的影响来改善水质。实验发现添加芽孢杆菌控制弧菌等致病菌比加抗生素更好,许多不同的抗生素是由一系列的芽孢杆菌所产生,许多细菌在同一时间不可能对所有抗生素都有抗性基因,特别是如果它们以前未曾与芽孢杆菌有过接触时。芽孢杆菌能分泌许多降解粘液和生物膜的酶,使得芽孢杆菌及其产生的抗生素能渗透进革兰氏阴性菌的粘液层;另外,芽孢杆菌与其它细菌竞争营养并且抑制其快速生长。基于以上功能,加上芽孢杆菌在生产过程中易保存等特点,芽孢杆菌制剂正成为目前研究和生产应用的热点。2.3
芽孢杆菌的施用芽孢杆菌在保存期间以芽孢的形式存在,养殖户在使用前,可用一定配制好的培养基活化、增殖,然后泼洒,可提高使用效果。由于大多数芽孢杆菌属好气性菌,在施用芽孢杆菌制剂时要注意保持水体中的溶氧量,以更好地发挥其作用。3、硝化细菌3.1
硝化细菌的特性硝化细菌属化能自养菌,专性好氧,大多是专性无机型。硝化细菌可分为2个亚群:亚硝化细菌和硝化细菌。亚硝化细菌将水体中的氨氧化为亚硝酸氮,硝化细菌将亚硝酸氮氧化为对水生动物无害的硝酸氮。硝化细菌是一类自养型生物,尤其是亚硝化细菌,无法利用现成的有机物,水体中无机物太多反而会抑制其生长。与异养性细菌相比,硝化细菌的繁殖周期特别长,因此在水中很难形成优势菌群。3.2
硝化细菌的作用硝化细菌的主要作用是降解水体中的氨氮,如果水体中无机盐类如NH4+等营养元素大量存在,能更好地促进硝化细菌的生长,起到明显的降氨氮效果。3.3
硝化细菌的施用使用硝化细菌有2种方法,一种是应用预先培养附着硝化细菌的生化培养球;另一种是向池中直接泼洒硝化细菌制剂。硝化细菌发挥作用的适宜条件为:pH
值7~9,低于6不利硝化细菌生长;水温在30℃
时活性最高;水中溶解氧对硝化细菌作用影响很大,溶解氧含量高则硝化作用能更好进行。此外,光对硝化细菌的生长繁殖有抑制现象。建议在使用硝化细菌制剂时,要注意水中溶解氧含量及光照强度。4、复合微生态制剂许多学者和生产厂家试图利用不同菌株的不同特性,将多种微生物菌株培育后复合为复合微生态制剂,以期发挥它们的综合效果。但由于不同微生物菌株的生长、繁殖条件不同,同一水质条件能否同时满足所有复合菌株发挥作用,值得进一步深入研究。

(2)对养殖动物的作用

光合细菌:可以快速吸收利用水体营养,当水体氨氮浓度过高时,施用光合细菌制剂可以有效缓解。光合细菌在弱光或黑暗条件下也能进行光合作用,阴雨天时施用光合细菌制剂可净化水质。多为液态产品,可以用池塘水稀释,全池泼洒。

将常用的渔用配合饲料和自来水混合放置在透明容器中,比如玻璃缸、有机玻璃缸、无色透明塑料桶等,其中渔用配合饲料以4~15克/升为宜。待饲料泡水并沉积到容器底部后,对较深的容器底部沉积的饲料曝气,每立方米水体中空气曝气量宜在3~5米3
/时。而容器较小时,可以不曝气而让其自然腐烂。通过曝气可以加速饲料的降解腐烂。并且饲料腐烂培养期间需要较高的水温,一般以
20~40℃为宜。同时需要合适的光照,最合适在玻璃温室中进行,其中光照强度可控制在合适范围,而夏季室外的自然光照过于强烈,需要进行遮光,遮光率宜在50%左右。

应用于水产养殖上的微生态制剂按用途可分为两大类:

虽然目前有许多商品性的有益微生物制剂应用于水产养殖业,但大多数是为陆生动物设计的,有的菌株并不适合水产养殖动物的消化和养殖水体的环境,因水产养殖动物为低等动物或冷血动物,其消化道内的微生态系统与陆生动物有很大不同,养殖水体环境也与陆地环境有很大不同,在选择菌种时应引起充分注意,要在研究基础上加以选择和确认。

目前应用于水产养殖的是光合细菌等。适用的水环境条件是PH6~9.5,10~38℃,盐度0~40‰。每次施用使养殖水体浓度达到5~10ppm。

随着培养时间的延长,水体也逐渐变成暗褐色,甚至逐渐变成暗红色,即实现了水体中浮游态的红假单胞菌属光合细菌的培养。但浮游态光合细菌的培养与饲料的添加量有关,饲料添加量偏低时,水体往往难以变成暗红色,难以生长出浮游态光合细菌,即该菌的附着态生长优势先于浮游态优势出现。

一、概念及种类

菌种的选择问题

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二、红假单胞菌属光合细菌的培养效果

一类是内服以提高鱼虾免疫力的饲料微生态添加剂,目前应用较多的菌类有乳酸菌、芽孢杆菌、酵母菌等;

芽孢杆菌,革兰氏染色阳性,是普遍存在的一类好气性细菌,枯草芽胞杆菌的分布非常广泛,土壤、湖泊、海洋、动植物体表及其栖息地皆能发现。该类菌无毒性,能分泌出活性强的蛋白酶等多种酶类,在其生命过程中又能以孢子体形式存在,易于生产和保存,作为饲料微生态添加剂和水体微生态调控剂都有广阔前景。枯草芽胞杆菌在生长繁殖过程中能够产生B1
、B2、
B6等B族维生素和维生素C、维生素K2,为水产动物提供维生素营养,日常食用的纳豆芽孢杆菌就能产生大量的维生素K2。

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培养过程中,饲料与水的添加比例要控制好,饲料太多或者太少均不利于培养。饲料太多时,水体中耗氧严重而不利于饲料的降解,光合细菌培养时间会延长;饲料太少时,营养盐水平跟不上,容易出现浮游植物的生长,而不利于光合细菌的优势形成及维持。

近年来,人们开始尝试在养殖水体中施用有益微生物制剂来改善养殖生态环境,提高养殖动物的免疫力,抑制病原微生物,从而减少疾病的发生。微生物制剂是由一些对人类和养殖对象无致病危害并能改良水质状况,能抑制水产病害的有益微生物制成。主要有硝化细菌、光合细菌、枯草杆菌、放线菌、乳酸菌、酵母菌、链球菌和EM微生物菌群等。它们具有改良水质、增加溶氧、降低氨氮、抑制致病菌生长、改善动物体内水环境生态平衡、提高动物抗病与免疫力,促进养殖对象生长等功能。

微生态制剂一般10~15天施用一次,要注意天气,禁止与抗生素、消毒剂等同时施用。**需要‘玛卡’辣木籽‘天麻****‘文山三七’‘铁皮石斛’**‘黑枸杞’‘玫瑰花’‘柠檬片’等等**的朋友可以加个人微信号:13382563813私聊**

表1为2017-2018年在玻璃温室中添加饲料到透明容器进行培养的情况,图1是与表1对应的容器中附着态红假单胞菌属光合细菌生长的培养效果图(见彩中插2)。

在养殖池添加比如以芽孢杆菌属菌类为主导菌的微生物复合制剂时,利用其需氧微生物与厌氧微生物共栖,兼有需氧与厌氧代谢机制的特性,迅速而彻底地降解进入养殖池的有机物,减少有机物在池底的沉积,避免有毒因子的产生。

(2)乳酸菌:乳酸菌可以快速利用有机酸、糖、肽等溶解态有机物,能快速降解亚硝酸盐,使水质清新。当水质老化、溶解有机物多、亚硝酸盐增高、PH值过高等,可以施用乳酸菌制剂进行调控。多为液态产品,使用时可用一定比例红糖水活化、增殖,几小时后用池水稀释,泼洒。

三、本方法的主要优势与不足

(1) 硝化细菌的特性

图片 1

四、注意事项

因此,在使用微生态制剂前,应测定有个水环境因子的指标,依此选择相适应的微生态制剂,并通过改进措施,达到最为理想的效果。

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一般情况下曝气培养30~40天,便可获得比较理想的培养结果,容器内壁上容易出现紫红色至暗红色的生物附着,其附着的最大厚度可以在1~2毫米,即实现了附着态光合细菌的培养。其中的优势种类是红假单胞菌属光合细菌。附着的光合细菌可以直接刮取下来,呈现为暗红色的泥浆状物质,这免去了对浮游态光合细菌的浓缩过程而直接获得极高浓度的光合细菌。可直接用于养殖水体的水质调控,或者作为浮游动物的活饵料等。

使用硝化细菌有2种方法,一种是应用预先培养附着硝化细菌的生化培养球;另一种是向池中直接泼洒硝化细菌制剂。硝化细菌发挥作用的适宜条件为:pH
值7~9,低于6不利硝化细菌生长;水温在30℃
时活性最高;水中溶解氧对硝化细菌作用影响很大,和芽孢杆菌一样,也需要有充足的溶氧其使用效果才好,溶解氧含量高则硝化作用能更好进行。此外,光对硝化细菌的生长繁殖有抑制现象。建议在使用硝化细菌制剂时,要注意水中溶解氧含量及光照强度。

表1 多个容器中的培养情况

另外,EM菌与动物肠道内有益菌的大量增殖,能够抑制大肠杆菌的活动,并促进机体对饵料的消化吸收,从而降低蛋白质向氨和胺的转化,使排泄物中的氨氮含量减少,达到净化水质、促进生长的作用。由于池塘泼洒EM菌后,水质相对较清,故这些塘不宜或少养肥水鱼,如鲢、鳙等鱼。

目前市场上有很多的光合细菌产品,尤其是淘宝网上都能便捷地购买到高浓度的光合细菌。但这些光合细菌产品是浮游态生长的,并且这些培养基的配方均是商业机密。而公开的光合细菌的培养液中需要添加多种成分,尤其是营养物质丰富的酵母膏或牛肉膏等,配置过程相对繁琐。本文介绍一种便捷的、原料来源丰富的光合细菌培养方法,其原料是渔用配合饲料,并且可生长出附着态的光合细菌。养殖户可自行在养殖过程中培养光合细菌并应用到养殖水体中。

六、正确认识和使用水产微生物制剂

传统的培养基培养光合细菌的方法虽然很可靠、稳定,但是需要的条件比较苛刻,并且需要利用多种原料进行培养基的配置而显得繁琐,而本方法的培养环境是敞开的自然环境,培养基是常用的渔用配合饲料,这在养殖场所非常容易获得,且容易控制,因此对养殖户而言是个非常好的便捷方法。

1、光合细菌

随着培养方法和培育设施的进步,后续会逐渐研发出更便捷的培养方法,以减少对曝气的依赖。因为曝气在培养过程中的作用主要是提供氧气,以促进饲料在有氧条件下的降解腐烂,而当水较浅时,空气中的氧气能够溶入到水底部时,可以不进行曝气。如果有其他方法能够解决氧气的来源或者说促进饲料与空气的接触,便可以获得更快捷的培养方法。

复合微生物制剂是采用存在于自然环境中的多种微生物菌株经诱变选育,扩培后得到混合菌剂。应用复合微生物制剂对养殖水体进行处理,它能有效降解有机淤泥,抑制有害微生物和有害藻类的繁殖,平衡养殖水体的微生态环境,促进养殖生物健康生长,利用这一菌剂对养殖水体的微生态环境进行调控,是目前水产养殖中水处理的一种较为理想的办法。

在光合细菌的连续培养中,为了缩短培养时间,可以在初始添加饲料时添加光合细菌母液,初始的母液添加量越多,即初始时光合细菌的比例越高,饲料后续的降解腐烂会越快,也越容易获得附着态和浮游态光合细菌的大量生长。一般可以将附着态光合细菌大量生长的培养时间缩短至20天左右。

使用微生态制剂时,一定要注意菌体的数量和活力,一般要求每毫升含3亿个以上的活菌体,且活力要强。试验表明,随着微生态制剂保存期的延长,活菌数量逐渐减少,其作用效果明显降低。所以除应注意妥善储存外,还应尽早使用,制剂的颜色和气味发生明显变化,则可能意味着菌体已开始死亡腐败,尽量不要再使用。

一、利用渔用配合饲料培养红假单胞菌属光合细菌的一种方法

现在,许多学者和生产厂家试图利用不同菌株的不同特性,将多种微生物菌株培育后复合为复合微生态制剂,以期发挥它们的综合效果。但由于不同微生物菌株的生长、繁殖条件不同,同一水质条件能否同时满足所有复合菌株发挥作用,值得进一步深入研究。

各种环境因子都可能对微生态制剂产生一定的影响,我们应把不良影响降到最小,选择适宜的水环境,一般控制pH
6-8,水温15-35℃,水体溶解氧2毫克/升以上。

光对硝化细菌的生长,繁殖也有一定的抑制作用,它和光合细菌相反以不要或微弱光照为宜。

EM菌有助于提高水体的pH。

如今我国微生态制剂虽在水产养殖中取得了不错的效果,但存在的问题仍是显而易见的,要想水产微生态制剂能有一个良好的发展前景,正确认识和使用水产微生态制剂变得十分关键。尽管有益微生物制剂在水产养殖业的应用结果表明其有许多优点,研究和开发工作日益加深,应用范围也日益扩大,但仍存在一些问题和待研究领域,这一点应引起足够的重视。

(1)、安全性

当然,不同菌株受环境因子的影响也有所不同。

(1)对水体的作用

不同种类的微生态制剂其针对性和作用效力不尽相同。

芽孢杆菌有明显的降低亚硝酸盐的作用;

EM菌(有效微生物菌群)是采用适当的比例和独特的发酵工艺将筛选出来的有益微生物混合培养,形成复合的微生物群落,并形成有益物质及其分泌物质,通过共生增殖关系组成了复杂而又相对稳定的微生态系统。

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